臨床微生物檢驗標準化操作程式

第一篇管理要求 / 001

第一章·組織和管理002
第一節微生物實驗室硬體設置及管理程式 / 003
實驗室設施和環境條件 / 003
實驗室設備管理程式 / 005
實驗室試劑及耗材管理程式 / 008
第二節微生物實驗室人員崗位設置及管理 / 010
人員配置基本要求 / 010
人員崗位職責設置程式 / 011
人員培訓及能力評估程式 / 014
實驗室與臨床溝通程式 / 016

第二章·品質管制程式017
第一節品質保證程式 / 018
能力驗證活動管理程式 / 018
室內品質控制管理程式 / 020
品質改進程式 / 025
品質風險評估和風險管理程式 / 027
第二節微生物檢驗方法學性能評價 / 029
微生物檢驗方法學性能驗證程式 / 029
微生物實驗室內人員比對程式 / 031
微生物實驗室間比對程式 / 032

第三章·安全風險評估與生物防護033
第一節微生物實驗室安全風險評估及管理 / 034
實驗室風險評估程式 / 034
二級生物安全管理程式 / 036
疑似高致病性微生物標本管理程式 / 039
第二節微生物實驗室生物防護及其管理 / 040
實驗室防護和應急管理程式 / 040
菌種管理程式 / 042
危險性化學品使用管理程式 / 043
檢驗後標本保存和處理常式 / 045
廢棄物處理常式 / 046
消毒滅菌管理程式 / 047
職業暴露處理常式 / 048
傳染性病原微生物報告的管理程式 / 049

第二篇技術要求 / 051

第四章·檢驗前品質管制052
第一節標本採集前程式 / 053
微生物檢驗專案申請程式 / 053
微生物檢驗標本條碼程式 / 054
採樣前患者識別程式 / 055
第二節標本採集及送檢程式 / 056
標本採集、運送、保存程式 / 056
標本接收、標識及資訊錄入程式 / 060
標本拒收程式 / 061

第五章·微生物實驗室儀器設備標準操作規程063
第一節一般儀器設備的標準操作規程 / 064
恒溫培養箱標準操作規程 / 064
CO2培養箱標準操作規程 / 066
厭氧培養系統標準操作規程 / 068
真菌培養箱標準操作規程 / 071
生物安全櫃標準操作規程 / 073
普通光學顯微鏡標準操作規程 / 075
螢光顯微鏡標準操作規程 / 077
普通冰箱標準操作規程 / 079
低溫冰箱標準操作規程 / 080
普通離心機標準操作規程 / 082
Cytospin　4細胞塗片機標準操作規程 / 084
普通移液器標準操作規程 / 086
連續加樣移液器標準操作規程 / 088
電熱高溫接種滅菌器標準操作規程 / 090
旋渦混合器標準操作規程 / 091
恒溫水浴箱標準操作規程 / 092
pH計標準操作規程 / 093
遊標卡尺標準操作規程 / 095
電子天平標準操作規程 / 096
壓力蒸汽滅菌器標準操作規程 / 098
比濁儀標準操作規程 / 100
第二節血培養儀標準操作規程 / 101
BacT/ALERT　3D血培養儀標準操作規程 / 101
BACTEC　9000血培養儀標準操作規程 / 104
BACTEC　FX血培養儀標準操作規程 / 107
VersaTREK血培養儀標準操作規程 / 110
DLBt全自動血培養系統標準操作規程 / 113
LABSTAR血培養儀標準操作規程 / 116
AutoBC　System全自動血培養系統標準化操作規程 / 119
第三節微生物鑒定儀器標準操作規程 / 121
VITEK　2全自動微生物鑒定儀標準操作規程 / 121
BD　Phoenix全自動微生物鑒定儀標準操作規程 / 125
WalkAway系列全自動細菌鑒定和藥敏分析儀標準操作規程 / 129
Biofosun微生物鑒定藥敏分析系統標準操作規程 / 133
DL96細菌測定系統標準操作規程 / 137
XK細菌鑒定藥敏分析系統標準操作規程 / 139
第四節其他儀器標準操作規程 / 142
PREVI　Isola全自動平板接種儀標準操作規程 / 142
Probact　System自動化細菌分離培養系統標準操作規程 / 145
LARK全自動平板接種儀標準化操作規程 / 147
雲魯合Hawk系列全自動微生物樣本處理系統標準操作規程 / 149
MB80微生物快速動態檢測標準操作規程 / 151

第六章·常用培養基及試劑標準操作規程154
第一節培養基標準操作規程 / 155
營養瓊脂培養基配製標準操作規程 / 155
血瓊脂培養基配製標準操作規程 / 156
巧克力培養基配製標準操作規程 / 157
麥康凱瓊脂培養基配製標準操作規程 / 158
TCBS瓊脂培養基配製標準操作規程 / 159
淋球菌培養基配製標準操作規程 / 160
MH培養基配製標準操作規程 / 161
HTM培養基配製標準操作規程 / 162
CaryBlair轉運培養基配製標準操作規程 / 163
營養肉湯培養基配製標準操作規程 / 164
牛腦心浸液培養基配製標準操作規程 / 165
厭氧血瓊脂培養基配製標準操作規程 / 166
L型細菌固體培養基配製標準操作規程 / 167
沙氏葡萄糖蛋白腖瓊脂培養基配製標準操作規程 / 168
第二節常用生化試驗標準操作規程 / 169
觸酶試驗標準操作規程 / 169
氧化酶試驗標準操作規程 / 170
凝固酶試驗標準操作規程 / 171
DNA酶試驗標準操作規程 / 172
CAMP試驗標準操作規程 / 173
反向CAMP試驗標準操作規程 / 174
β內醯胺酶試驗標準操作規程 / 175
新生黴素敏感試驗標準操作規程 / 176
Optochin敏感試驗標準操作規程 / 177
衛星試驗標準操作規程 / 178
嗜血桿菌因數試驗標準操作規程 / 179
膽汁溶菌試驗標準操作規程 / 180
葡萄糖O/F試驗標準操作規程 / 181
克氏雙糖鐵試驗標準操作規程 / 182
三糖鐵試驗標準操作規程 / 183
七葉苷試驗標準操作規程 / 185
吲哚試驗標準操作規程 / 186
硝酸鹽還原試驗標準操作規程 / 187
脲酶試驗標準操作規程 / 189
賴氨酸脫羧酶試驗標準操作規程 / 190
鳥氨酸脫羧酶試驗標準操作規程 / 191
精氨酸雙水解酶試驗標準操作規程 / 192
苯丙氨酸脫氨酶試驗標準操作規程 / 193
枸櫞酸鹽利用試驗標準操作規程 / 194
丙二酸鹽利用試驗標準操作規程 / 195
硫化氫試驗標準操作規程 / 196
4％氫氧化鉀拉絲試驗標準操作規程 / 197

第七章·血清學試驗標準操作規程198
第一節腸道致病菌血清學試驗標準操作規程 / 199
沙門菌血清學檢測標準操作規程 / 199
志賀菌血清學檢測標準操作規程 / 200
致病性大腸埃希菌血清學檢測標準操作規程 / 201
O157：H7出血性大腸埃希菌血清學檢測標準操作規程 / 202
O1群、O139群霍亂弧菌血清學檢測標準操作規程 / 203
第二節其他血清學試驗標準操作規程 / 204
鏈球菌血清學檢測標準操作規程 / 204

第八章·微生物相關抗體抗原檢測標準操作規程205
第一節微生物相關抗體檢測標準操作規程 / 206
結核分枝桿菌抗體血清學檢測標準操作規程 / 206
軍團菌抗體檢測標準操作規程 / 208
肺炎支原體抗體檢測標準操作規程 / 209
人型支原體抗體檢測標準操作規程 / 210
解脲脲原體抗體檢測標準操作規程 / 211
梅毒反應素抗體檢測標準操作規程 / 212
梅毒密螺旋體抗體檢測標準操作規程 / 213
肥達反應標準操作規程 / 214
冷凝集試驗標準操作規程 / 216
第二節微生物相關抗原檢測標準操作規程 / 217
沙眼衣原體抗原檢測標準操作規程 / 217
隱球菌抗原乳膠凝集試驗標準操作規程 / 218
隱球菌抗原檢測標準操作規程 / 219
尿肺炎鏈球菌抗原檢測標準操作規程 / 221
細菌性陰道炎唾液酸酶檢測標準操作規程 / 222

第九章·各種染色方法標準操作規程223
第一節細菌染色標準操作規程 / 224
革蘭染色標準操作規程 / 224
瑞氏染色標準操作規程 / 226
抗酸染色標準操作規程 / 227
螢光染色標準操作規程 / 229
鞭毛染色標準操作規程 / 231
潘本漢染色標準操作規程 / 232
第二節真菌染色標準操作規程 / 233
耶氏肺孢子菌瑞氏吉姆薩染色標準操作規程 / 233
隱孢子菌——改良抗酸染色標準操作規程 / 235
墨汁染色標準操作規程 / 236
乳酸酚棉藍染色標準操作規程 / 237
過碘酸希夫染色標準操作規程 / 238
六胺銀染色標準操作規程 / 240
真菌鈣螢光白染色標準操作規程 / 242
真菌KOH壓片標準操作規程 / 243

第十章·各種標本的塗片鏡檢與培養標準操作規程245
第一節各種標本的塗片鏡檢標準操作規程 / 246
腦脊液塗片標準操作規程 / 246
糞便塗片標準操作規程 / 247
穿刺液塗片標準操作規程 / 248
膿液及傷口分泌物塗片標準操作規程 / 249
褥瘡潰瘍標本塗片標準操作規程 / 250
尿標本塗片標準操作規程 / 251
生殖系統標本塗片標準操作規程 / 252
前列腺分泌物塗片標準操作規程 / 253
痰標本塗片標準操作規程 / 254
支氣管肺泡灌洗液、保護毛刷標本塗片標準操作規程 / 256
鼻腔、鼻咽、咽喉分泌物塗片標準操作規程 / 257
眼部分泌物塗片標準操作規程 / 258
耳分泌物塗片標準操作規程 / 259
口腔標本塗片標準操作規程 / 260
胃液標本塗片標準操作規程 / 261
第二節各種類型標本培養標準操作規程 / 262
血液及骨髓標本培養標準操作規程 / 262
腦脊液標本培養標準操作規程 / 266
痰、支氣管肺泡灌洗液、保護毛刷標本培養標準操作規程 / 269
鼻腔、鼻咽、咽喉分泌物標本培養標準操作規程 / 277
眼部標本培養標準操作規程 / 280
耳部標本培養標準操作規程 / 282
穿刺液標本培養標準操作規程 / 284
引流液標本培養標準操作規程 / 287
尿液標本培養標準操作規程 / 289
生殖道標本培養標準操作規程 / 293
糞便標本培養標準操作規程 / 296
膿及傷口標本培養標準操作規程 / 299
褥瘡潰瘍標本培養標準操作規程 / 302
中心靜脈導管標本培養標準操作規程 / 304
組織標本培養標準操作規程 / 307
前列腺標本培養標準操作規程 / 310
人體植入物標本培養標準操作規程 / 313
腹透液標本培養標準操作規程 / 316

第十一章·常見病原菌及高致病菌檢驗標準操作規程318
第一節常見病原菌檢驗標準操作規程 / 319
葡萄球菌屬檢驗標準操作規程 / 319
微球菌屬檢驗標準操作規程 / 322
鏈球菌屬檢驗標準操作規程 / 324
腸球菌屬檢驗標準操作規程 / 327
奈瑟菌屬檢驗標準操作規程 / 329
卡他莫拉菌檢驗標準操作規程 / 331
棒狀桿菌屬檢驗標準操作規程 / 333
李斯特菌屬檢驗標準操作規程 / 335
丹毒絲菌屬檢驗標準操作規程 / 337
諾卡菌屬檢驗標準操作規程 / 339
馬杜拉放線菌屬檢驗標準操作規程 / 341
埃希菌屬檢驗標準操作規程 / 343
致病性大腸埃希菌檢驗標準操作規程 / 345
沙門菌屬檢驗標準操作規程 / 347
志賀菌屬檢驗標準操作規程 / 349
克雷伯菌屬檢驗標準操作規程 / 351
腸桿菌屬檢驗標準操作規程 / 353
沙雷菌屬檢驗標準操作規程 / 355
變形桿菌屬檢驗標準操作規程 / 357
摩根菌屬檢驗標準操作規程 / 359
枸櫞酸桿菌屬檢驗標準操作規程 / 361
耶爾森菌屬檢驗標準操作規程 / 363
副溶血弧菌檢驗標準操作規程 / 365
鄰單胞菌屬檢驗標準操作規程 / 367
氣單胞菌屬檢驗標準操作規程 / 369
假單胞菌屬檢驗標準操作規程 / 371
產堿桿菌屬檢驗標準操作規程 / 373
不動桿菌屬檢驗標準操作規程 / 375
色桿菌屬檢驗標準操作規程 / 377
金黃桿菌屬檢驗標準操作規程 / 379
莫拉菌屬檢驗標準操作規程 / 381
嗜血桿菌屬檢驗標準操作規程 / 383
軍團菌屬檢驗標準操作規程 / 385
彎麴菌屬檢驗標準操作規程 / 387
螺桿菌屬檢驗標準操作規程 / 389
第二節高致病菌檢驗標準操作規程 / 391
布魯菌屬檢驗標準操作規程 / 391
法蘭西斯菌屬檢驗標準操作規程 / 393
鼠疫耶爾森菌檢驗標準操作規程 / 395
霍亂弧菌檢驗標準操作規程 / 397
炭疽芽孢桿菌檢驗標準操作規程 / 399

第十二章·抗菌藥物敏感試驗標準操作規程401
第一節抑菌試驗標準操作規程 / 402
KB法標準操作規程 / 402
稀釋法標準操作規程 / 405
濃度梯度擴散法（Etest）標準操作規程 / 406
棋盤格法聯合藥敏試驗標準操作規程 / 407
第二節臨床常見菌抗菌藥物敏感試驗標準操作規程 / 408
腸桿菌科紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 408
假單胞菌屬紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 409
不動桿菌屬紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 410
嗜麥芽窄食單胞菌紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 411
洋蔥伯克霍爾德菌紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 412
葡萄球菌屬紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 413
腸球菌屬紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 414
鏈球菌屬紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 415
腦膜炎奈瑟菌紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 417
淋病奈瑟菌紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 418
流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌紙片擴散法藥物敏感試驗標準操作規程 / 419
產色素頭孢菌素試驗標準操作規程 / 420
超廣譜β內醯胺酶測定標準操作規程 / 421
耐甲氧西林葡萄球菌紙片擴散法篩選試驗標準操作規程 / 423
耐萬古黴素腸球菌篩選試驗標準操作規程 / 424
誘導性β內醯胺酶試驗標準操作規程 / 425
誘導性克林黴素耐藥試驗標準操作規程 / 426
改良Hodge試驗標準操作規程 / 427

第十三章·分枝桿菌實驗診斷標準操作規程428
標本採集及處理標準操作規程 / 429
抗酸桿菌塗片鏡檢標準操作規程 / 431
分枝桿菌屬檢驗標準操作規程 / 433
快速生長分枝桿菌檢驗標準操作規程 / 436

第十四章·厭氧菌檢驗標準操作規程438
標本採集及處理標準操作規程 / 439
厭氧菌檢驗標準操作規程 / 441

第十五章·臨床真菌標本實驗診斷標準操作規程445
第一節真菌標本採集及檢驗標準操作規程 / 446
標本採集及處理標準操作規程 / 446
真菌塗片標準操作規程 / 448
第二節真菌常用鑒定方法標準操作規程 / 451
透明膠帶法絲狀菌鏡檢標準操作規程 / 451
真菌小培養標準操作規程 / 452
第三節真菌藥物敏感試驗標準操作規程 / 454
念珠菌藥敏試驗標準操作規程 / 454
真菌Etest藥敏試驗標準操作規程 / 456
ATB　FUNGUS　3標準操作規程 / 460

第十六章·非培養輔助檢測標準操作規程461
第一節細菌非培養輔助檢測標準操作規程 / 462
革蘭陰性菌脂多糖檢測標準操作規程 / 462
降鈣素原（PCT）檢測標準操作規程 / 464
C反應蛋白（CRP）檢測標準操作規程 / 467
第二節真菌非培養輔助檢測標準操作規程 / 469
真菌β（1，3）D葡聚糖檢測標準操作規程 / 469
曲黴菌半乳甘露聚糖檢測標準操作規程 / 471
隱球菌莢膜多糖檢測標準操作規程 / 474

第十七章·質譜及分子生物學鑒定標準操作規程477
第一節細菌及真菌測序鑒定標準操作程式 / 478
細菌16Sr　DNA測序鑒定標準操作程式 / 478
真菌ITS/D2測序鑒定標準操作程式 / 481
第二節質譜鑒定細菌及酵母菌標準操作規程 / 484
MALDITOFMS質譜鑒定細菌及酵母菌標準操作規程 / 484

第十八章·檢驗程式性能驗證486
第一節顯微鏡檢查的性能驗證 / 487
濃縮標本顯微鏡檢查性能驗證 / 487
非濃縮標本顯微鏡檢查性能驗證 / 489
第二節顯微鏡檢查的人員比對 / 490
革蘭染色塗片檢查人員比對 / 490
抗酸染色塗片檢查人員比對 / 492
特殊染色塗片檢查人員比對 / 494
痰標本品質評估人員比對 / 496
第三節血培養儀性能驗證 / 498
血培養儀性能驗證 / 498
A血培養儀與B血培養儀性能比對 / 502
第四節一般培養性能驗證及人員比對 / 504
一般培養的性能驗證 / 504
結核分枝桿菌培養的性能驗證 / 506
標本分離培養人員比對 / 508
標本定量培養計數人員比對 / 510
培養結果判讀人員比對 / 512
第五節選擇性平板性能驗證 / 514
XLD瓊脂平板性能驗證 / 514
SS瓊脂平板性能驗證 / 515
麥康凱瓊脂平板性能驗證 / 516
巧克力瓊脂平板性能驗證 / 517
第六節非選擇性平板性能驗證 / 518
血瓊脂平板性能驗證 / 518
沙保弱瓊脂平板性能驗證 / 519
第七節臨床微生物鑒定程式性能驗證 / 520
微生物鑒定儀性能驗證 / 520
MALDITOFMS質譜儀性能驗證 / 522
定量接種環性能驗證 / 524
志賀菌血清學試驗性能驗證 / 526
沙門菌血清學試驗性能驗證 / 527
致病性大腸埃希菌血清學試驗性能驗證 / 528
O157：H7出血性大腸埃希菌血清學試驗性能驗證 / 529
第八節血清學試驗人員比對 / 530
志賀菌血清學試驗人員比對 / 530
沙門菌血清學試驗人員比對 / 532
致病性大腸埃希菌血清學試驗人員比對 / 534
O1群、O139群霍亂弧菌血清學試驗人員比對 / 536
第九節藥敏試驗的性能驗證 / 538
全自動微生物藥敏試驗性能驗證 / 538
KB法藥敏試驗性能驗證 / 540
KB法藥敏試驗測量抑菌圈直徑人員比對 / 542
第十節不同儀器/方法的性能比對 / 544
A微生物鑒定和藥敏儀與B微生物鑒定和藥敏儀性能驗證比對 / 544
質譜儀與自動微生物鑒定儀比對 / 550

第十九章·檢驗後結果報告及資料處理常式552
第一節報告程式 / 553
結果報告程式 / 553
危急值報告程式 / 555
第二節結果發佈標準程式 / 556
分級報告程式 / 556
傳染病報告程式 / 557
更改報告程式 / 558
細菌耐藥監測與上報程式 / 559

第二十章·菌種保存程式560
需氧菌種保存程式 / 561
厭氧菌種保存程式 / 563
結核分枝桿菌保存程式 / 564
真菌菌種保存程式 / 565

附錄566
一、 實驗室記錄表格 / 567
二、 現場評審不符合項舉例 / 602
 

ISO15189是國際標準組織為醫學實驗室標準化而發佈的專用要求，集中了世界各國專家的智慧和經驗。ISO15189認可是推動和促進醫學實驗室規範化管理水準、提高檢驗結果準確性和有效性的重要手段，是證實醫學實驗室檢驗能力的國際權威和通用途徑。

《臨床微生物檢驗標準化操作程式》（醫學實驗室ISO15189認可指導叢書）是根據CNASCL02：2012《醫學實驗室品質和能力認可準則》和CNASCL02A005：2018《醫學實驗室品質和能力認可準則在臨床微生物學檢驗領域的應用說明》，對《臨床微生物檢驗標準化操作》第三版進行修訂而成。同時，就讀者提出的意見和建議，對相關內容做了修改、增補和更新。

本書邀請二十多位國內知名臨床微生物檢驗專家參與編寫，在修訂過程中，先由專家們搜集資料，進行討論，共同決定本書編寫方案。初稿撰寫完後，交叉分送各位專家審核，對提出的問題再次組織討論，經集中討論並修改後最終定稿。

《臨床微生物檢驗標準化操作程式》依據ISO15189標準中品質體系建立的要求，按照微生物實驗室的工作流程，依次介紹了組織和管理、品質管制、安全管理、檢驗操作程式、實驗室記錄表格、不符合項、微生物領域現場核查要點等內容。全書共涉及400余項標準操作規程（SOP）和70餘個品質和技術記錄表格。該書對申請醫學實驗室ISO15189認可有較高的指導意義和實用價值，並可作為各級醫院微生物室標準化操作和規範化管理的實踐手冊，是必備的實用性工具書和參考書。

本書在編寫過程中得到了多方面的支持和幫助。海軍軍醫大學附屬長征醫院實驗診斷科胡海清、陳險峰、張玲珍等承擔了本書部分校對工作。在此謹向各位專家和同仁的辛勤勞動表示誠摯的謝意。

本書在內容和品質上均較前書更為完善，但由於時間比較倉促，欠缺和不足之處在所難免，歡迎專家和讀者批評指正。

2019年6月